HGC-27细胞培养指南 | 实验步骤与防污染技巧（新手必读）

HGC-27细胞是一种来源于人胃癌患者转移性淋巴结的低分化胃癌细胞系，具有较强的侵袭性和增殖能力，常用于研究胃癌的分子机制、药物筛选以及侵袭与转移特性分析。它在体外呈上皮样贴壁生长，呈多角形或短梭形，以单层形式生长。能够在免疫缺陷小鼠中形成移植瘤，是胃癌相关研究的重要模型。

一、实验准备（关键物料清单）

✅ 细胞来源：建议从ATCC/中科院细胞库获取（批号可溯源）
✅ 培养基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1%双抗（Gibco品牌优选）
✅ 仪器：37℃恒温CO₂培养箱（CO₂浓度5%）、生物安全柜（洁净度100级）

二、详细培养步骤

1. 复苏操作

快速解冻37℃水浴≤2分钟离心去DMSO1000rpm×5min重悬接种初始密度2×10⁴ cells/cm²

⚠️ 防冻伤要点：解冻后立即转移至预温培养基

2. 传代方法

• 消化控制：0.25%胰酶（含EDTA）作用2-3分钟（镜下观察细胞变圆）

• 终止技巧：加入含血清培养基（体积≥3倍消化液）

• 分瓶比例：1:3至1:4（24-48小时可达80%融合度）

3. 冻存方案

• 冻存液配方：90% FBS + 10% DMSO（现用现配）

• 程序降温：4℃ 30min → -20℃ 2h → 液氮长期保存

三、培养问题排查（附解决方案）

⚠️ 注意事项（提升实验成功率）

• 状态监控：每日观察细胞形态（贴壁率＜50%需排查）

• 传代周期：不超过30代（建议定期STR鉴定）

• 污染预防：操作前紫外灭菌30min，试剂瓶酒精喷淋

  
  

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