免疫共沉淀（CO-IP）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。那么你知道免疫共沉淀实验操作有哪些吗？让我们一起来看看吧！一、蛋白样品制备裂解提取出免疫沉淀需要的蛋白样品，以下为HEK293T细胞样品的处理方法，其余的样品制备方法参阅相关文献。单层贴壁细胞总蛋白的提取：1.收集细胞：10cm细胞培养板上，每板细胞加1ml，4℃预冷的PBS（0.01MpH7.2～7.3）。反复冲洗把所有挂壁细胞洗下来转移到1.5ml离心管内离心：3400rpm2...

相当多的蛋白质行使功能的时候并不是单打独斗的，蛋白质们通过蛋白质相互作用形成复合体然后进行工作。因此，研究蛋白质的相互作用成为研究蛋白质功能和作用机制的最为重要的环节之一。那么你知道研究蛋白质相互作用的方法有哪些吗？让我们一起来看看吧！一、酵母双杂交系统原理：很多真核生物的位点特异转录激活因子通常具有两个可分割开的结构域，即DNA特异结合域（DNA-bindingdomain,BD）与转录激活域（Transcriptionalactivationdomain,AD）。这两个结...

优质的试剂，良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异，那么你知道ELISA实验的操作要点有什么吗？让我们一起来看看吧！一、标本的采取和保存可用作ELISA测定的标本十分广泛，体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液)，有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白...

你知道RNA提取准备工作及注意事项都有什么吗？让我们一起来看看吧！一、枪头和EP管等的消毒灭菌1.用去离子水配制0.1%（千分之一）的DEPC（剧毒物），须在通风橱中小心使用，避光密闭4℃保存;DEPC水是用DEPC处理过并经高温高压消毒的纯水。经检测不含RNase、DNase和proteinase。2.将枪头和EP管放入0.1%的DEPC内，保证枪头和EP管内都充满0.1%的DEP。3.避光、静置、过夜（12-24h）4.装枪头和EP管的盒子不需要用DEPC浸泡，将枪头或者...

你知道该如何配置培养基吗？让我们一起来看看吧！一、细胞实验全程注意事项1.无菌操作是重中之重，细胞培养对无菌条件比较苛刻，实验人在进行整个细胞实验的无菌意识一定要强，否则一个不小心，发生细菌污染，轻则浪费细胞，重则污染整个培养箱。2.实验人员进入细胞房前应该换上干净的鞋子、白大褂、手套和口罩。3.所有耗材放入工作台前都需用75%酒精进行消毒，双手进入工作台前也需要用75%的酒精进行消毒。4.进行实验前应先对工作台进行紫外灭菌30min以上，并将所有需要用到的耗材放到工作台上一...