方法一：1.根据样品重量（1g样品加入3.5ml提取液，可根据材料不同适当加入），准备提取液放在冰上。2.样品放在研钵中用液氮研磨，研磨后加入提取液中在冰上静置（3-4小时）。3.用离心机离心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4.提取上清夜，样品制备完成。5.蛋白质提取液：300ml1Mtris-HCl（PH8）45ml甘油（Glycerol）75ml聚乙烯吡咯烷酮（Polyvinylpolypyrrordone）6g这种方法针对SDS-PAGE，垂...

一、LNA的介绍锁核酸（Lockednucleicacid，LNA）是一种经过修饰的RNA，LNA中一部分核糖上的2'与4'碳连结在一起。一般可见于A-DNA或RNA。这类核酸可以增加引物或探针（probe）的融解温度（Tm值），加强这些实验用物质的稳定性，可应用在即时聚合酶连锁反应（real-timePCR）等技术中。近期,锁核酸(lockednucleicacid,LNA)作为一种新颖的核苷酸衍生物在药学研究领域引起了人们的广泛关注,有希望成为分子水平治疗各种疾病的新突破...

‌重组质粒发生逃逸的原因主要包括细胞分裂时不均匀分配、受体细胞的遗传影响、外源基因过度表达、以及环境因素。‌一、‌重组质粒发生逃逸的原因一‌细胞分裂时不均匀分配‌：在细胞分裂过程中，重组质粒可能不均匀地分配到子代细胞中，导致一些子代细胞不含有重组质粒，从而发生逃逸。这种逃逸与质粒的拷贝数有关，低拷贝数质粒在分裂时更有可能导致子代细胞不含重组质粒‌。二、‌重组质粒发生逃逸的原因二‌受体细胞的遗传影响‌：受体细胞的核酸酶可能将重组质粒视为外来DNA并进行降解，阻碍其独立复制。此外...

一、重组蛋白重组蛋白（recombinantprotein）是指应用重组DNA或重组RNA技术而获得的蛋白质。重组蛋白工程先应用基因克隆或化学合成技术获得目的基因（geneofinterest，GOI），连接到适合的表达载体，导入到特定的宿主细胞，利用宿主细胞的遗传系统，表达出有功能的蛋白质分子。重组蛋白的正确溶解步骤包括离心、溶解和（可能的话）进一步处理。二、重组蛋白溶解步骤一开盖前离心试剂管。冻干粉在运输过程中可能会因颠簸而漂散并粘贴于管壁或管盖上，所以在打开塑料瓶盖前，...

一、前言蛋白质印迹法（WesternBlot）通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色，通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的分子生物学技术。WesternBlotting实验单层贴壁细胞总蛋白的提取步骤：二、操作步骤1.倒掉培养液，并将瓶倒扣在吸水纸上使吸水纸吸干培养液（或将瓶直立放置一会儿使残余培养液流到瓶底然后再用移液器将其吸走）。2.每瓶细胞加3ml4℃预冷的PBS（0.01MpH=7.2～7.3）。平放轻轻摇动1...